Những câu hỏi ngắn về PCR (vì topic kia bị lock rồi !)

Còn câu này nữa, mong các anh chỉ giúp !

Tôi cũng có ý chờ xem có ai trả lời không vì tôi cũng không rành cái này lắm, nhưng chả thấy ai lên tiếng. Đành trả lời bạn vài câu vậy. Taq polymerase hoạt động cũng không hoàn toàn chính xác. Thật ra nó có thể dùng một số chất tương tự với các nucleotide để tổng hợp DNA. dUTP là một trường hợp như thế, và nếu bạn ngó vào protocol, thì đa số các protocol PCR có dùng dUTP, nồng độ của nó thường gấp đôi hoặc gấp 3 nồng độ của 3 loại dNTP còn lại (thường là 400nM so với 200nM của dATP, dCTP và dGTP), với nồng độ cao gấp đôi như vậy, đây là hình thức "ép" thằng Taq phải sử dụng dUTP.
Cách đánh dấu sản phẩm PCR cũng lợi dụng khả năng "cầm nhầm" của các DNA polymerase. Theo nghiên cứu (Roche Applied Science) thì Taq polymerase có thể "cầm nhầm" digoxigenin-11-dUTP và fluorescein-12-dUTP, trong khi đó Pwo DNA polymerase lại có thể sử dụng biotin-dUTP tốt hơn Taq đến 30 lần.

Cám ơn câu trả lời rất hay của anh, weirdhobbit ạ ! Thực ra ban đầu em cũng đoán ra việc "cưỡng ép" Taq phải ăn món dUTP sau khi xem thành phần một bộ hoá chất premix của Promega. Em vẫn đang tiếp tục tìm hiểu thêm.
Gửi anh concay: Xin lỗi Huy Nguyễn vì em đã nói mà chưa giữ lời, lẽ ra theo đúng lời hứa thì em sẽ phải gửi tiền vào tài khoản của HN để có thể nhận quyển sách mà em đã yêu cầu. Nhưng nếu phải bỏ thêm 20.000 để gửi thì có lẽ em sẽ phải tìm một ai đó có tài khoản tại Vietcombank vậy, như vậy tuy mất thời gian, nhưng đối với sv như bọn em thì thà để tiền mua sách còn hơn là mất tiền làm việc khác. Mong anh Concay và Huy Nguyễn thông cảm, đừng nghĩ em nuốt lời.
Cám ơn các anh nhiều !