1. Tuyển Mod quản lý diễn đàn. Các thành viên xem chi tiết tại đây

PCR

Chủ đề trong 'Công nghệ Sinh học' bởi ConCay, 13/04/2003.

  1. 1 người đang xem box này (Thành viên: 0, Khách: 1)
  1. vietbio

    vietbio Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    29/09/2004
    Bài viết:
    59
    Đã được thích:
    0
    chắc bạn phải chạy thêm PCR hoặc bạn quá may mắn với các phản ứng PCR trước đây. Nồng độ DNA cần kiểm soát vì nó không chỉ liên quan đến có nhiều sản phẩm hay ko mà còn ảnh hưởng tới tính đặc hiệu của phản ứng.
    http://vi.wikipedia.org/wiki/PCR
  2. baotruong

    baotruong Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    18/05/2005
    Bài viết:
    4
    Đã được thích:
    0
    uh Mình không biết rành chuyện này. Trước giờ có bao giờ mình lo chuyện nồng độ đâu nhỉ, cần DNA thì nhổ cọng tóc nhúng vô proteinase K thôi. :-)
  3. vietbio

    vietbio Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    29/09/2004
    Bài viết:
    59
    Đã được thích:
    0
    Ok thôi, thế bạn đã chạy RFLP / AFLP chưa? nếu bạn ko khống chế nồng độ DNA ban đầu thì đa hình các băng vạch sẽ lẫn lộn.
    Còn việc nồng độ DNA quá cao có thể xuất hiện một số băng ko đặc hiệu, nhất là khi bạn nhân từ genome thực vật hoặc vi khuẩn (vì bạn tách được khá nhiều DNA từ mô thực vật hoặc culture vi khuẩn). Nhưng đúng là nếu bạn tách DNA từ tóc thì chắc có gì phải lo nhiều DNA quá. Chỉ phải lo là phải phân tích ông hói đầu
  4. bluesunandmoon

    bluesunandmoon Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    02/06/2005
    Bài viết:
    2
    Đã được thích:
    0
    Huum, thật ra theo kinh nghiệm của tui làm, thì nếu đo được nồng độ của DNA thì tốt nhất, trừ trường hợp mình không có điều kiện để đo thôi. Nếu các bác đo được DNA conc. thì quá tiện lợi cho các bác có thể tối ưu hoá phản ứng của mình.
    Với mỗi một loại polymerase của các nhà sản xuất khác nhau đều tuân theo một protocol của nhà sản xuất đấy, trong đó người ta luôn đề cập đến [DNA], vì có biết được nó thì mới có thể tính chính xác được lượng enzyme cần thiết được. Hơn nữa, như concay và con-rua (tui quên mất nick rồi) có nói, nồng độ DNA ảnh hưởng trực tiếp đến PCR product.
    Người ta cũng không khuyến cáo chạy PCR với số vòng lặp lại cao quá! Số chu kỳ lặp lại càng cao thì sai số trong sản phẩm càng lớn (tất nhiên là ít chu kì quá thì không đủ sản phẩm để mà dùng rồi). Chưa kể là nếu kéo dài số chu kì ra thì cũng phải xem xét đến khả năng hoạt động của DNA polymerase, hay nồng độ dNTPs .... Ngay cả trong trường hợp dùng sản phẩm PCR lần đầu để làm template cho lần PCR thứ 2 cũng (có thể) gây ra sự sai khác trên các nucleotite!
    Tui lại chuẩn bị Mix PCR nữa mới chán!

Chia sẻ trang này