PHƯƠNG PHÁP ELISA

PHƯƠNG PHÁP ELISA



Chào cả nhà!

Mình đang nghiên cứu về phương pháp ELISA, một số thiết bị có ứng dụng huỳnh quang, phát quang.

Mình cần các bạn giúp cho những vấn đề sau:
1. Định nghĩa theo sinh học những thuật ngữ này
2. Ứng dụng của những kĩ thuật này trong chuẩn đoán, xét nghiệm.
VD: Tại sao lại phải sử dụng huỳnh quang, sử dụng huỳnh quang trong những trường hợp nào.

Mong tin của các bạn.

ELISA: enzyme linked immunity sorbent assay, phản ứng miễn dịch gắn men
đây là pp phân tích định tính protein
kháng thể (antibody) là một chất có khả năng tạo liên kết với kháng nguyên antigen. Protein, lipid và hydratecarbon là các antigen. nếu kháng thể chỉ đặc hiệu với một loại kháng nguyên duy nhất thì gọi là kháng thể đơn dòng Mabs (Monoclonal antibodies).
PP elisa lợi dụng tc của Mabs để định tính protein, giả sử bạn muốn biết có protein a trong mẫu hay ko, bạn chỉ cần sử dụng Mabs của a, nó chỉ liên kết đc với a thui. Mabs này đc đánh dấu (để dễ phát hiện ra thôi), có hai kiểu đánh dấu
- đánh dấu huỳnh quang: soi dưới máy huỳnh quang là thấy, pp này rẻ hơn nhưng tín hiệu ko tinh, tức là bạn sẽ thấy một vầng huỳng quang trên phim chụp
- đánh dấu phóng xạ: các ntố pxạ đc cài vào như 32P, 15N, pp này mắc nhưng tín hiệu rất tinh, chỉ thấy 1 điểm sáng trên phim chụp, soi bằng phim như máy chụp x quang ý.
sau khi cho mabs vào mẫu, bạn tiến hành rửa mẫu và đem soi, nếu có tín hiệu thì có nghĩa là protein a có trong mẫu.
ngày nay có một số mabs có khả năng tạp pứ màu với detector (giống như pp đổi màu hồng khi gặp base vậy đó), điều này giúp cho thao tác kiểm tra đơn giản và có thể sử dụng cho người ko chuyên, que thử thai là một ví dụ. tuy nhiên số mabs có detector này khá ít.
và cuối cùng làm sao để có đc mabs này thì là cả một vấn đề lớn, bởi vì mabs là chất cảm ứng và chỉ đc tổng hợp bởi hệ miễn dịch động vật (cái này xin xem thêm trong tài liệu về miễn dịch nghen).

Cảm ơn bạn rất nhiều. Mình sẽ tìm hiểu thêm thông tin.