1. Tuyển Mod quản lý diễn đàn. Các thành viên xem chi tiết tại đây

Thư dãn: Làm thế nào có thể chiết tách được DNA ????

Chủ đề trong 'Công nghệ Sinh học' bởi damdan, 26/07/2004.

  1. 0 người đang xem box này (Thành viên: 0, Khách: 0)
  1. damdan

    damdan Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    17/07/2004
    Bài viết:
    22
    Đã được thích:
    0
    Thư dãn: Làm thế nào có thể chiết tách được DNA ????

    Bạn có biết là chúng ta có thể nhìn thấy được DNA (Deoxyribonuleic acid ) ? Nhưng bằng cách nào?

    Bạn hãy theo 3 bước chỉ dẫn rất đơn giản dưới đây:

    Alcohol (Cồn)

    Enzyme (hoặc chất làm mềm thịt)

    Detergent (Chất tẩy rửa)





    Trước hết, bạn cần tìm ra những cái có chứa DNA. Thực ra khi người ta chứng minh được DNA là cơ sở thiết kế của cuộc sống, mọi vật sống đều chứa DNA.


    Trong thí nghiệm này, chúng tôi dùng hạt đậu xanh đã nghiền đôi. Nhưng có rất nhiều nguồn mà bạn có thế chiết tác DNA từ đó như:

    Rau



    Hành tây

    Súp lơ

    Bây giờ là phần khá thú vị. Bạn hãy cho nguyên liệu vào máy xay sinh tố :

    -nguồn DNA (khoảng 10ml hoặc ½ côc đậu vỡ)

    -một nhúm muối (ít hơn 1ml hoặc 1/8 thìa dùng cho uống trà)

    -một lượng nước lạnh bằng hai lần lượng nguồn DNA (khoảng 200ml hay 1 cốc)

    Xay ở mức độ cao trong vòng 15 giây.

    Máy xay sẽ phân tách các tế bào đậu, vì thế bạn sẽ thấy có một dung dịch súp tế bào đậu. Do đây là một bước tiến hành rất messy, vì thế có một số nguồn DNA mà bạn không thể dùng tới được, ví dụ như:

    -con vật nuôi trong gia đình, con chó của bạn chẳng hạn !

    -ngón chân cái của chị gái bạn !

    -mấy con rệp mà bạn bắt được ngoài sân !

    Và bây giờ là ba bước rất dễ thực hiện:

    1, Lọc dung dịch súp, cho dịch lỏng thu được vào một cốc chứa khác, có thể là một cốc đong.

    Bạn hãy xem bạn thu được bao nhiêu dịch? Từ đó thêm vào một lượng chất tẩy rửa bằng 1/6 thể tích dung dịch bạn có (khoảng 30ml hay 2 thìa to) và khuấy để hoà tan. Để lắng trong vòng 5-10 phút.

    Đổ hỗn hợp vào trong các ống nghiệm hoặc các cốc thuỷ tinh nhỏ, khoảng 1/3 thể tích của vật chứa.

    Bạn hãy dùng một trong những chất tẩy rửa sau:

    Palmolive, Crystal White, ?

    Tại sao phải sử dụng chất tẩy rửa nhỉ? bạn có biết tại sao không? ;)


    2, Cho một ít enzyme vào mỗi ống nghiệm và khuâý nhẹ nhàng. Hãy cẩn thận! Bới lẽ nếu bạn khuấy quá mạnh, bạn có thể sẽ làm đứt DNA, và như thế sẽ rất khó có thể nhìn thấy được.

    Sử dụng chất làm mềm thịt làm enzyme. Nếu bạn không kiếm được, thử dùng nước dứa hay dung dịch rửa kính áp tròng.

    Vậy bạn có biết enzyme là gì không?


    3, Nghiêng ống nghiệm và đổ từ từ cồn để rửa vào (dùng isopropyl hoặc ethyl 70-95%) theo thành ống để tạo thành một lớp ở phía trên hỗn hợp dịch đậu. Đổ thêm cồn một lượng tương đương với lượng dịch đậu có trong ống.

    DNA sẽ từ trong dung dịch đậu nổi lên phía trên trong lớp dung dịch cồn. Bạn có thể dùng một que bằng gỗ hoặc một cái móc để kéo and lên lớp cồn.



    Vậy đám xơ thu được là cái gì?

    Cồn có tỷ trọng nhỏ hơn nước, vì thế nó nổi lên trên lớp dung dịch đậu. Khi phân tách thành hai lớp, tất cả những chất béo hay protein mà ta phá vỡ trong 2 bước đầu và DNA sẽ suy nghĩ: ?o nên chọn lớp dung dịch nào để tồn tại?? Câu hỏi này giống như khi bạn vào trong phòng và bạn sẽ có suy nghĩ tìm kiếm mọt chiếc ghế phù hợp. Một số sẽ chọn ghế có đệm, trong khi số khác lại thích ghế cứng.

    Trong trường hợp này, protein và chất béo sẽ nằm ở phần dưới, là phần nước, trong khi DNA lại thích nằm ở trong lớp cồn ở phía trên.

    DNA là phân tử dài, dạng dây bị xoắn vào như một búi.

    Nếu bạn thu được một bó như thế. Xin chúc mừng! Bạn đã tách được DNA!

    Bây giờ, bạn có thể tự hào là bạn đã chiết tách thành công DNA từ một nguồn, bạn có thể tiến xa hơn với các thí nghiệm khác. Bạn hãy thử tự làm những thí nghiệm sau:

    -Tiến hành tách DNA với những nguồn khác. Nguồn nào bạn thu được nhiều DNA hơn cả ? Và bạn so sánh như thế nào?

    -Thí nghiệm với các loại chất tẩy rửa và xà phòng khác nhau. Liệu xà phòng bột có tốt hơn chất tẩy rửa ở dạng lỏng hay không?

    -Làm thí nghiệm mà bỏ bớt đi một hoặc thay đổi thứ tự các bước. Bạn hãy tự kiểm tra xem các bước mà chúng tôi nói với bạn có thực sự cần thiết hay không? Hãy cố gắng xem sự cần thiết của các bước và lượng nguyên liệu sử dụng cần thiết.

    -Bạn có nghĩ là chỉ có các cơ thể sống mới có DNA. Bạn hãy thử tìm xem liệu có DNA trong những vật mà bạn nghĩ là có thể không chứa DNA xem sao.


    FAQ (Những câu hỏi thường gặp)


    1, Tôi chẳng nhìn thấy DNA đâu cả. Vậy tôi làm sai cái gì?

    Trước hết, bạn hãy kiểm tra lại lần nữa xem có DNA hay không. Nhìn thật kỹ trong lớp cồn xem có bọt tăm bé tý hay không. Thường thì cụm DNA sẽ bám vào bọt.

    Nếu bạn tin chắc là không thấy có DNA, thì bạn hãy xem lại xem bạn có lấy đủ DNA từ nguồn nguyên liệu ban đầu để làm thí nghiệm hay không? Đôi khi, một số loại quả chứa quá nhiều nước, ví dụ như nho chẳng hạn. Nếu dịch súp có nhiều nước có thể lượng DNA không đủ để có thể nhìn thấy bằng mắt thường. Để xác định được điều đó, bạn hãy làm lại, và bớt lượng nước lạnh thêm vào.

    Trong thực tế, dịch súp là đục nên bạn khó có thể đánh giá được chính xác.

    Một lý do khác có thể là do bạn không để đủ thời gian của các bước hoàn chỉnh. Hãy nhớ rằng bạn phải khuấy dịch vớI chất tẩy rửa ít nhất trong 5 phút. Nếu tế bào và màng nhân vẫn còn nguyên thì DNA vẫn bị nằm ở lớp dưới. Thường thì, nếu bạn để yên ống nghiệm chứa dịch đậu và cồn 30-60 phút thì DNA sẽ kết tủa ở lớp cồn.


    2, Tại sao DNA lại kết đám lại với nhau?

    Mỗi phân tử DNA riêng lẻ là dài và có dạng sợi dây. Mỗi tế bào của cơ thể chứa 6 feet and, nhưng chiều rộng của nó chỉ là một phần triệu inch. Để có thể tồn tại trong tế bào, cần phải thu gọn thật hợp lý. Để thực hiện điều đó, DNA cuốn lại thật chặt và kết cụm vào nhau ở phía trong tế bào. Ngay cả khi bạn tách DNA ra khỏi tế bào, chúng vẫn dính với nhau, cho dù không chặt như ở bên trong tế bào.

    Hãy tưởng tượng điều này: cơ thể con người chứa khoảng 100 tỷ tỷ tế bào, mỗi tế bào lại chứa 6 feet and. Nếu bạn làm một con tính sẽ thấy chiều dài của DNA trong cơ thể chúng ta vượt quá cả một nghìn tỷ dặm DNA!


    3, Liệu tôi có thể dùng được DNA này cho phép điện di hay không?

    Tât nhiên là được, nhưng bạn sẽ chỉ nhìn thấy một vết mờ. DNA mà bạn tách được là genomic, nghĩa là bạn thu được cả một tập hợp DNA của toàn bộ tế bào. Trừ phi bạn cắt DNA thu được bằng enzyme đặc hiệu (restriction), nếu không DNA đó sẽ quá dài và loằng ngoằng để dịch chuyển qua các lỗ của gel; và vì thế cuối cùng bạn sẽ chỉ thấy được một vết mờ.


    4, Liệu đám xơ màu trắng thu được là hỗn hợp của DNA và RNA ?

    Chính xác là vậy! Quy trình chiết tách DNA thực sự là một quy trình chiết tách nucleic axit. Tuy vậy, hầu hết các RNA bị cắt bởi enzyme ribonucleaza (enzyme cắt RNA) được giải phóng khi tế bào bị phá vỡ.


    oohoui
  2. ConCay

    ConCay Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    18/02/2003
    Bài viết:
    950
    Đã được thích:
    0
    hi, bạn ơi cho mình hỏi thăm 1 chút, thế nếu mình cần tách chừng 1 kilo DNA thì mình cần bao nhiêu ký da hả bạn?
  3. damdan

    damdan Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    17/07/2004
    Bài viết:
    22
    Đã được thích:
    0
  4. ConCay

    ConCay Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    18/02/2003
    Bài viết:
    950
    Đã được thích:
    0
    Da thì tui kô cho đâu, nhưng lông thì vô tư, ngày nào nó cũng rụng một mớ, phải quét rồi dọn, mệt gần chết. Dạo này nhờ ăn thức ăn đóng hộp của Thái Lan đầy đủ dinh dưỡng nên bộ lông trở nên láng bóng, ít rụng hơn, nhưng nếu để phục vụ "pha học", tui sẵn sàng lén lén bứt cho một nùi. À, nó có 3 màu, trắng-đen-nâu, bạn thích màu gì cứ nói anh IRES sẽ gửi cho
    Nhưng câu hỏi của tôi là nghiêm túc đấy, bạn thử trả lời giúp mọi người đi.
    À, sẵn tiện nhiều chuyện, bạn cho hỏi luôn, ví dụ như tui có đúng 1 tế bào, thay vì 1 con gà hay 1 tấn carốt để tách DNA (ví dụ như có đúng 1 tb trứng hay 1 tinh trùng) thì có cách nào tách được DNA không bạn?
    Với lại cho tui théc méc 1 chút, khi bạn tách DNA tui thấy nào là xay là nghiền là giã là đâm là dập, sao mà thấy thương bộ genome quá, thế vậy lúc ta tách ra rồi thì cái DNA genome nó là nguyên vẹn thơ ngây như lúc nó còn trong tb hay là bị vùi hoa dập liễu tơi tả đến nổi nát bấy banh chành hả bạn?
    Được concay sửa chữa / chuyển vào 20:53 ngày 27/07/2004
  5. damdan

    damdan Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    17/07/2004
    Bài viết:
    22
    Đã được thích:
    0
  6. damdan

    damdan Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    17/07/2004
    Bài viết:
    22
    Đã được thích:
    0
  7. ConCay

    ConCay Thành viên mới

    Tham gia ngày:
    18/02/2003
    Bài viết:
    950
    Đã được thích:
    0
    bạn nói nó có trinh nguyên đẹp đẽ thì tui tin nó cũng đẹp đẽ trinh nguyên. Nhưng mà tui nhớ là người ta hay xài mấy cái enzyme cắt hạn chế cắt giới hạn gì đó để băm vằm xẻ nát bộ genome ra. Vậy chứ mấy thằng bạo lực như cồn, thuốc tẩy, thậm chí cả enzyme lúc cho vô để phá màng tb thay vì chuyên tâm lo làm việc của mình là phá màng tb thì nó có léng phéng làm bậy làm bạ với em genome đang nằm trong buồng í lộn trong nhân không? Lỡ nó có thì sao? làm cách nào để tin là mấy thằng bạo lực này chỉ biết "ăn chay"? Và khi ta bế cô em genome xin đẹp nõn nà từ nhân ra, có cách nào ta kiểm tra coi em còn zin không?
    À, còn nữa, lúc mình có em DNA sạch sẽ thom tho rồi thì mình cho em ở đâu? Ở nhiệt độ bao nhiêu là em khoái nhất? Hồi trước em ở trong nhân, có nệm ấm chăn êm, bây giờ em theo mình về nhà mình thì mình cất nhà mới cho em chứ. đúng không bạn. Và khi em ở trong căn buồng lý tưởng này thì em có hay "băng hà" không? Ta giữ em được bao lâu là tối đa?
    Mà bạn ơi, bạn còn chưa trả lời tui câu hỏi cũ nghen là nếu cần 1 kg DNA thì cần bao nhiêu ký lông? Bạn phải nói để tui bảo ires chuẩn bị chứ, không thôi anh ấy đem đổ hết à.

Chia sẻ trang này